產品分類

您的位置:首頁> 技術文章> ELISA試劑盒檢測方法的優缺點說明

技術文章

ELISA試劑盒檢測方法的優缺點說明

時間:2019-08-15 瀏覽次數:103

                     ELISA試劑盒檢測方法的優缺點說明

大學新生活啦,我把一滴滴拚搏的汗水裝進許願瓶中,把一個個奮鬥的足跡畫在黃金紙上,把一級級成長的台階留在照片裏,把一個個真心的祝福寫到短信裏,願你的大學生活永遠快樂。接下來介紹 ELISA試劑盒檢測方法的優缺點說明.

一、直接法

將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標記的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特

異性非常重要。

1.優勢:操作手續簡短,因無須使用二抗可避免交互反應。

2.缺點:試驗中的一抗都得用酶標記,但不是每種抗體都適合做標記,費用相對提高。 

二、間接法

此測定方法與直接法類似,差別在於一級抗體沒有酶標記,改用酶標記的二級抗體去辨識一級

抗體來測定抗原量。

1.優勢:二抗可以加強信號,而且有多種選擇能做不同的測定分析。不加酶標記的一級抗體則

能保留它*多的免疫反應性。

2.缺點:交互反應發生的機率較高。

三、雙抗體夾心法

被檢測的抗原包被在兩個抗體之間,其中一個抗體將抗原固定於固相載體上,即捕捉抗體。另

一個則是檢測抗體,此抗體可用酶標記後直接測定抗原的量;或不標記,再透過酶標記的二級抗體來測定抗原的量。這兩種抗體必須小心選取,才可避免交互反應或競爭相同的抗原結合部位。

1.優勢:高靈敏、高專一性,抗原無須事先純化。

2.缺點:抗原一定得擁有兩個以上的抗體結合部位。

四、競爭法

樣本裏的抗原(自由抗原)和純化並固定在固相載體上的抗原(固定抗原)一起競爭相同的抗體,

當樣品裏的自由抗原越多,就可以結合越多的抗體,而固定抗原就隻能結合到較少的抗體,反之亦然。經清洗步驟,洗去自由抗原和抗體的複合物,隻留下固定抗原和抗體的複合物,拿來與隻有固定抗原的對照組結果相比較,根據呈色差異就可計算出樣品裏的抗原含量。

1.優勢:可適用比較不純的樣本,而且數據再現性很高。

2.缺點:整體的敏感性和專一性都較差。

 

五、基於細胞法

是一種新的定性蛋白檢測技術,將細胞直接在微孔板裏培養,待檢測時,不需抽提蛋白和裂解

細胞,便可直接測量微孔板裏蛋白經刺激或抑製作用後的變化。

1.優勢:無需裂解細胞,所以目標蛋白損失*少,可測定完整細胞、黏附細胞、還有非粘附細

胞。

2.缺點:不能測定抗原量。

在線客服
返回頂部
123