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超氧化物歧化酶試劑盒的檢測方法及使用事項說明

時間:2019-08-26 瀏覽次數:34

  超氧化物歧化酶試劑盒的作用:
  超氧化物歧化酶又稱過氧化物歧化酶。SOD屬於金屬酶,按照結合金屬離子種類不同,該酶有以下三種:含銅與鋅超氧化物歧化酶(CUZNSOD)、含錳超氧化物歧化酶(MN—SOD)和含鐵超氧化物歧化酶(Fe—SOD)。SOD主要存在於胞液和線粒體基質中,是防禦生物體氧化損傷的一種十分重要的酶。它的作用底物是超氧陰離子自由基O2-·,可將其催化歧化為氧氣和過氧化氫。這種酶在保護生物細胞免受超氧自由基和由其形成的活性氧類(例如H2O2,·OH)的毒害方麵起著重要作用。
 
  超氧化物歧化酶試劑盒的檢測方法:
  測定意義:SOD(EC1.15.1.1)廣泛存在於動物、植物、微生物和培養細胞中,催化超氧化物陰離子發生岐化作用,生成H2O2和O2。SOD不僅是超氧化物陰離子清除酶,也是H2O2主要生成酶,在生物抗氧化係統中具有重要作用。
  測定原理:通過黃嘌呤及黃嘌呤氧化酶反應係統產生超氧陰離子(O2-.),O2-.可還原氮藍四唑生成藍色甲臢,後者在560nm處有吸收;SOD可清除O2-.,從而抑製了甲臢的形成;反應液藍色越深,說明SOD活性愈低,反之活性越高。
  試驗中所需的儀器和試劑:可見分光光度計、台式離心機、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水
 
  超氧化物歧化酶試劑盒的使用:
  該超氧化物歧化酶試劑盒通過使用黃嘌呤(Xanthine)/黃嘌呤氧化酶(XOD)體係生成超氧化物陰離子。加入發色基團,發色基團可被由上述體係產生的氧化物陰離子還原成為水溶性的黃色甲染料,這樣SOD活性通過抑製發生基團的還原來測定。超氧化物歧化酶試劑盒通過一個可信的方案快速檢測,細胞裂解液、血漿、血清以及組織勻漿中的SOD活性。每個試劑盒內包含空白樣、SOD標準對照,能完成100次檢測。
 
  超氧化物歧化酶試劑盒使用注意事項說明:
  1、試劑盒保存:部分試劑保存於-20℃,部分試劑保存於2-8℃,具體以標簽上的標示為準。
  2、濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
  3、剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少量水樣物質,此為正常現象,不會對實驗結果造成任何影響。
  4、中、英文說明書可能會有不一致之處,請以英文說明書為準。
  5、所有的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。
  6、有效期:6個月。
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